提供：TogoWiki

2010年10月21日 (木) 09:37時点における版

Galaxy グループログ

• メンバー
  • 神沼さん
  • 神田 (こうだ、トピックリーダー)
  • 中尾
  • 山口

• 興味のあるトピック書き出し
  • 具体的にどう使ってるのか?
    • 外部にだしてるのは少なくて、ローカルで使うパターンばかりが多い
  • セキュリティはどうすれば?
    • ヒトデータをアップロード可能かな? (これは倫理関係だからここではパスかな)
    • ユーザーごとに分離されてるか?
  • ユーザーごとにツールの表示をカスタマイズ出来るか?
    • デフォルトだと全部表示されて、ユーザーには多すぎる → 現状ユーザごとにはできない，サイトごとなら tool_conf.xml を書き換えて再起動する．詳しくは下記．
  • ソフトウェアを同梱して配布可能なのか調べたい
    • DBCLS Galaxy は既にこの形で配布している

まだ未解決・知ってたら教えて欲しい(ﾁﾗｯﾁﾗｯ・またはプラン@SOMEDAY

• 複数のファイルが出力されるケースの対応 # こうだ
  • どれか一つを決め打ちで出力としたい
  • 可能なら複数の出力を持ち越せるといい
• 元々入ってる Intersect が使いこなせない # こうだ
• 現状、最終的な可視化が NGS ビューワーの IGV に頼っているが、UCSC Genome Browser か Track Star でも可視化できないか? # こうだ

タスク (ツール組み込み、ワークフロー作成)

手元でツール作成しつつ、本家or DBCLSに組込み公開する。

• Exome workflow (神田さん)
  • History からの Extract Workflow 便利・すごい!!
  • galaxy-central/database/files/000 にデータがたまるみたい http://skitch.com/mako/dhxbn/2
• (岩崎さん)
• SAMtoolsの変換ツール組込(長崎さん)
• workflow test(望月さん)
• (神沼)

結果ログ

インストール情報

galaxyOnMacOSX_install_log
http://bitbucket.org/galaxy/galaxy-central/wiki/GetGalaxy を参照 OSX 10.6.4です。
na% echo $shell /bin/tcsh 
na% mkdir ~/galaxy-python
na% ln -s /usr/bin/python2.6 ~/galaxy-python/python (2.5から2.6に変更し て今のとこ問題なし)
na% .tcshrcに set path = ($path ~/galaxy-python)
na% echo ${PATH}
/bin:/sbin:/usr/bin:/usr/sbin:/usr/local/bin:/usr/X11/bin:/usr/bin:/bin:/usr/sbin:/sbin:/usr/local/bin:/usr/X11/bin:/Applications/bioinfo/bwa- 0.5.8a:/Applications/bioinfo/samtools-0.1.7_i386-darwin:/Users/na/galaxy- python
参照先にあるhgがOSXに入ってないので... easy_installでインストール
na% which easy_install /usr/bin/easy_install
na% sudo easy_install Mercurial
Password:XXXXXXX Searching for Mercurial Best match: mercurial 1.6.2 Processing mercurial-1.6.2-py2.6-macosx-10.6-universal.egg mercurial 1.6.2 is already the active version in easy-install.pth Installing hg script to /usr/local/bin
Using /Library/Python/2.6/site-packages/mercurial-1.6.2-py2.6-macosx- 10.6-universal.egg
Processing dependencies for Mercurial Finished processing dependencies for Mercurial
na% /usr/local/bin/hg clone http://www.bx.psu.edu/hg/galaxy galaxy_dist
real URL is http://bitbucket.org/galaxy/galaxy-dist requesting all changes adding changesets
adding manifests adding file changes added 4093 changesets with 18251 changes to 4360 files updating to branch default 2776 files updated, 0 files merged, 0 files removed, 0 files unresolved
na% cd galaxy_dist
na% sh setup.sh
na% sh run.sh で起動

スケーラブル設定

galaxy / galaxy-central / wiki / DevConf2010 – Bitbucket でのトーク Building Scalable Galaxy - Nate Coraor と Galaxy Developer Conference 2010 レポート を参照。

• バックエンドDBの選択：デフォルトはsqlite3、PostgreSQLやMySQLに変更すると性能アップ。
• ファイルアップロード／ダウンロード時のI/Oブロックを回避する為のプロキシ設定。
• マシンのコア数にあわせたスレッドモデル。

調査情報

• 利用可能な世界中のworkflow
• 配布ライセンスの種類 = MIT

メニューのカスタマイズ

メニューのカスタマイズの際，変更するファイルは $GALAXY/tool_conf.xmlである．

例えば，DBCLS Galaxy( http://galaxy.dbcls.jp/ )の tool_conf.xml は下記のようになる：

<?xml version='1.0'?>
<toolbox>
  <section name='Get Data' id='getext'>                                  
    <tool file='data_source/upload.xml'/>
    <label text='DBCLS TogoWS Tools' id='togows_tools'/>
    <tool file='togows/search_resources.xml'/>
    <tool file='togows/search_resources_with_history.xml'/>
    <tool file='togows/get_restful_resources.xml'/>
    <tool file='togows/get_restful_togodb_resources.xml'/>
    <tool file='pubmed/pubmed_get_resource.xml'/>
    <label text='DBCLS Text Mining Tools' id='tm_tools'/>
    <tool file='medline/search_medline_direct.xml'/>
    <tool file='medline/search_medline_with_history.xml'/>
...

• section タグ Get Data, Send Dataなどのツールカテゴリの見出しの設定
• label タグ DBCLS TOGOWS TOOLS などの中見出しの設定
• tool タグ 各ツールの設定

• ツールカテゴリやツールを削りたいとき: 当該するタグを削除あるいはコメントアウトすることで，メニューからツールを削除する
• 新しいツールカテゴリを作りたいとき: section タグを新しく設定し，その中に入れたいツールの設定(toolタグ)を書く
• 新しいツールを組み込みたいとき: 下記，ツールの組み込み方を参照

ツールの組み込み方

galaxy / galaxy-central / wiki / NGSLocalSetup – Bitbucket
galaxy / galaxy-central / wiki / ToolConfigSyntax – Bitbucket tool_hoge.xml を書く際に参考にする (<param> tag set のセクションとか)

関連情報: DBCLS Galaxy に同梱のツールジェネレータを利用して，DBCLS Galaxy に自分のツールを組み込む ( http://galaxy.g.hatena.ne.jp/morita_hideyuki/ )

外部サイトをツールとして利用する場合（例：UCSC Table Browser） ( http://bitbucket.org/galaxy/galaxy-central/wiki/ExternalDisplayApplications/Tutorial ) 任意web application利用可能だが、web application側にgalaxy対応が必要。

10/21 ローカルの Galaxy にツール組み込み
http://bitbucket.org/galaxy/galaxy-central/wiki/NGSLocalSetup を読みつつインストール

1. BWA の組み込み

cd ~/Projects/bh10.10/galaxy/galaxy-central/tool-data
cp bwa_index.loc.sample bwa_index.loc

bwa_index.locに追記
hg18		/Users/mako/Projects/exome_tools_test/Data/hg18.fasta

bwa の実行ファイルをパスが通っているところに配置
cp bwa /usr/local/bin

hg18.fasta とそのインデックスファイルを galaxy ディレクトリに配置
cp ~/Projects/exome_tools_test/Data/hg18.* ~/Projects/bh10.10/galaxy/hg18_data/
hg18.fasta.ann
hg18.fasta.bwt
hg18.fasta.pac
hg18.fasta.rbwt
hg18.fasta.rpac
hg18.fasta.rsa
hg18.fasta.sa

Galaxy's built-in indexes will be available for download soon ということらしい

2. SAM Tools 組み込み

mate sam_fa_indices.loc
index	hg18	/Users/mako/Projects/exome_tools_test/Data/hg18.fasta

bwa の実行ファイルをパスが通っているところに配置
sudo cp ~/Downloads/exome_softwares/samtools/samtools /usr/local/bin/

hg18.fasta とそのインデックスファイルを galaxy ディレクトリに配置
cp ~/Projects/exome_tools_test/Data/hg18.fasta.fai ~/Projects/bh10.10/galaxy/hg18_data/

3. BEDTools 組み込み
http://groups.google.com/group/bedtools-discuss/browse_thread/thread/e3be681586693399 から始めた
http://cancan.cshl.edu/publicgalaxy/ ショウケースになってる

cp -r ../../../Download/galaxy_BEDTools/tool-data/BEDTools ~/Projects/bh10.10/galaxy/galaxy-central/tool-data/
cp -r ../../../Download/galaxy_BEDTools/tools/BEDTools ../tools/BEDTools
cp -r ../../../Download/galaxy_BEDTools/static/images/genomeCoverageBed_bedgraph.png ../static/images

Add the following section to <galaxy>/tool_conf.xml

    <section name="BEDTools" id="BEDTools">
        <tool file="BEDTools/genomeCoverageBed_bedgraph.xml" />
    </section>

History履歴を基にした最短Workflow作成法

1. History作成後に右上オプションからExtract Workflowを選択

2. Workflow nameをテキストボックス中に記入し、Create Workflowボタンを選択

3. Workflow menuに移動し、一番下の「Configure your workflow menu」を選択

4. Analyze data menuに移動して、左パネルのツールリストから「Workflows」をクリックすると、中央パネルにWorkflowの実行画面が現われる。後は「Run workflow」実行

公開されているツール

• 本家のユーザーベースなツール公開レポジトリ Galaxy Tool Shed。
• CSHLのHannon Laboratory public galaxy website

スクリーンショット

• workflow例1 (10/21午前)
• workflow例2 (10/21午前)
• workflow例3 (10.21午後)
• ワークフローで dbSNP に登録されている SNP を除去した後の SNP リスト (10.21午後)
• ワークフローで得られた一塩基変異を IGV で可視化した図 (10.21午後)